1、服務(wù)介紹:
Southern blot是將植物基因組總DNA酶切,通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳分離,變性之后利用虹吸原理印記到尼龍膜上,然后與變性的標記探針特異性地在一定溫度下退火,最后根據探針信號情況分析雜交結果的分子生物學(xué)技術(shù)。Southern blot可用于多種實(shí)驗目的,比如檢測目的片段拷貝數,基因突變分析,限制性片斷長(cháng)度多態(tài)性分析等。
2、服務(wù)內容
(1)DNA檢測、酶切、電泳、轉膜
(2)雜交,洗脫和信號檢測
3、服務(wù)結果
(1)實(shí)驗報告
(2)雜交X-光片
轉基因水稻的Southern blot分析(探針為epsps基因片段)
4、客戶(hù)須知
(1)客戶(hù)提供完整性良好的DNA樣品(完整性檢測以本公司檢測結果為準),DNA 樣品濃度需要在200 ng/μL以上;若檢測的是外源基因則提供對應探針區序列,載體酶切圖譜和10 ng原始轉化質(zhì)粒,及擴增探針所需引物(需說(shuō)明探針片段長(cháng)度、PCR退火溫度);若檢測的是植物內源基因,則提供對應探針區序列、攜帶對應探針區序列的質(zhì)粒,擴增探針所需引物(需說(shuō)明探針片段長(cháng)度、PCR退火溫度),及Southern blot希望使用的限制性?xún)惹忻感畔⒌龋?
(2)客戶(hù)提供原始樣品時(shí)須-20℃保存,如需本公司代為提取DNA,費用另計,報價(jià)根據物種類(lèi)型而定;
(3)不同作物所需提供DNA量見(jiàn)下表(請以qubit為準,nanodrop定量?jì)H作參考):
名稱(chēng) |
基因組大?。?/span>Mb) |
DNA雜交需求量(μg) |
植物葉片需求量(g) |
水稻 |
389 |
20 |
5 |
棉花 |
780 |
40 |
10 |
油菜 |
1130 |
50 |
10 |
玉米 |
2300 |
100 |
10 |
小麥 |
4500 |
200 |
20 |
大豆 |
1100 |
50 |
10 |
5、服務(wù)周期
客戶(hù)提供溶解好的DNA,周期為15個(gè)工作日;如需要公司提取DNA,服務(wù)周期為40個(gè)工作日。