1、服務(wù)介紹
轉(zhuǎn)基因材料插入位點兩側(cè)受體基因組序列是轉(zhuǎn)化體的特征標記,是建立其轉(zhuǎn)化事件特異性檢測方法、分析其插入失活基因的基礎(chǔ)。利用染色體步查、質(zhì)粒拯救、Tail-PCR、反向PCR等方法可以獲得轉(zhuǎn)基因材料插入位點的側(cè)翼序列。本服務(wù)是利用以上方法快速獲得轉(zhuǎn)基因材料的側(cè)翼序列。
2、服務(wù)內(nèi)容
(1)特異性轉(zhuǎn)化事件外源插入序列兩端的側(cè)翼序列
(2)側(cè)翼序列在受體染色體上的定位分析
3、服務(wù)結(jié)果
(1)提供至少一端側(cè)翼序列測序結(jié)果及染色體定位分析
(2)提供檢測特異性轉(zhuǎn)化事件的引物序列
轉(zhuǎn)基因水稻側(cè)翼序列的分離
A: 轉(zhuǎn)化事件特異性PCR。M:DNA marker;1和3分別是轉(zhuǎn)化事件左邊界和右邊界特異性PCR結(jié)果,2和4分別是以野生型水稻基因組為模板用轉(zhuǎn)化事件左右邊界特異性引物PCR擴增結(jié)果;B:轉(zhuǎn)基因在水稻染色體上的整合位點及整合方向分析;C:分離群體側(cè)翼序列共分離檢測電泳檢測圖(0.8%瓊脂糖凝膠電泳)上圖為側(cè)翼序列引物擴增,下圖為基因組引物擴增。
4、客戶須知
(1)客戶提供-20℃保存且完整性良好的總DNA樣品(完整性檢測以本公司檢測結(jié)果為準),或本公司代為提取總DNA,費用另計;
(2)提供靶標區(qū)(插入片段)完整序列(或酶切圖譜)。
5、服務(wù)周期
單拷貝插入植物植株,每個位點成功分離服務(wù)周期15個工作日。