1、服務(wù)介紹
轉基因材料插入位點(diǎn)兩側受體基因組序列是轉化體的特征標記,是建立其轉化事件特異性檢測方法、分析其插入失活基因的基礎。利用染色體步查、質(zhì)粒拯救、Tail-PCR、反向PCR等方法可以獲得轉基因材料插入位點(diǎn)的側翼序列。本服務(wù)是利用以上方法快速獲得轉基因材料的側翼序列。
2、服務(wù)內容
(1)特異性轉化事件外源插入序列兩端的側翼序列
(2)側翼序列在受體染色體上的定位分析
3、服務(wù)結果
(1)提供至少一端側翼序列測序結果及染色體定位分析
(2)提供檢測特異性轉化事件的引物序列
轉基因水稻側翼序列的分離
A: 轉化事件特異性PCR。M:DNA marker;1和3分別是轉化事件左邊界和右邊界特異性PCR結果,2和4分別是以野生型水稻基因組為模板用轉化事件左右邊界特異性引物PCR擴增結果;B:轉基因在水稻染色體上的整合位點(diǎn)及整合方向分析;C:分離群體側翼序列共分離檢測電泳檢測圖(0.8%瓊脂糖凝膠電泳)上圖為側翼序列引物擴增,下圖為基因組引物擴增。
4、客戶(hù)須知
(1)客戶(hù)提供-20℃保存且完整性良好的總DNA樣品(完整性檢測以本公司檢測結果為準),或本公司代為提取總DNA,費用另計;
(2)提供靶標區(插入片段)完整序列(或酶切圖譜)。
5、服務(wù)周期
單拷貝插入植物植株,每個(gè)位點(diǎn)成功分離服務(wù)周期15個(gè)工作日。